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《凝血因子活性測定技術(shù)標準》

一、范圍

本標準規(guī)定了用一期法檢測凝血因子（Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ）活性測定的技術(shù)要求。由于方法學(xué)不一致，本文件不涉及纖維蛋白原檢測和凝血因子XIII的檢測。

本標準適用于開展凝血因子活性檢測的醫(yī)學(xué)實驗室，用于規(guī)范相應(yīng)的檢測過程和質(zhì)量控制。

二、規(guī)范性引用文件

下列文件對于本標準的應(yīng)用是不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標準。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標準。

WS/T 359 血漿凝固實驗血液標本的采集及處理指南

三、術(shù)語與定義

下列術(shù)語和定義也適用于本文件。

1、凝血酶原時間

血漿與凝血活酶試劑（例如，組織因子）和氯化鈣反應(yīng)后發(fā)生凝固所需要的時間。

[來源：WS/T 359-2011，2.1]

2、活化部分凝血活酶時間

血漿與適量的氯化鈣（CaCl2）、部分凝血活酶試劑盒接觸因子激活劑（如白陶土）反應(yīng)后發(fā)生凝固所需要的時間。

[來源：WS/T 359-2011，2.2]

3、定標曲線、校準曲線、參考曲線

定量反映凝血因子活性與纖維蛋白形成所需時間之間的相互關(guān)系的曲線。

4、定標血漿、校準血漿、參考血漿

已知凝血因子活性的枸櫞酸鈉抗凝的正?；旌涎獫{，用于制備定標曲線。

5、乏因子血漿

缺乏待測凝血因子的血漿。

6、質(zhì)控血漿

源于人或動物血，或者人工制成的新鮮、冰凍或凍干的血漿，用于質(zhì)量控制。

7、緩沖液

具備緩沖酸堿能力的液體，如Owrens緩沖液、咪唑緩沖液等。

8、檢測系統(tǒng)

用于檢測或評估特定物質(zhì)存在與否，或?qū)ρ?、體液中的物質(zhì)進行定性、定量分析的一組裝置。檢測系統(tǒng)包括操作說明和所有的儀器、設(shè)備、試劑及（或）獲得檢測結(jié)果所需的物品。

四、檢驗前過程

1、標本采集

依照 WS/T 359的要求進行標本采集。選擇塑料針筒或者負壓采血系統(tǒng)，建議成年人血樣采集使用19G或21G針頭，嬰幼兒血樣采集使用22G或23G針頭，靜脈穿刺采血時，應(yīng)規(guī)范采血流程，一次穿刺成功，盡量避免引起凝血因子激活的操作。若患者的血細胞比容異常升高（Hct≥55%），應(yīng)按 WS/T 359推薦 的公式進行抗凝劑比例的調(diào)整。

標本采集前患者應(yīng)處于平靜和空腹狀態(tài)，劇烈運動和應(yīng)激反應(yīng)可使因子Ⅷ活性增加（其作用可持續(xù) 30 min）；脂血可使因子Ⅶ活化，同時干擾以光學(xué)法為原理的凝血儀的檢測結(jié)果，此時可改用手工或磁珠原理凝血儀進行測定。

2、標本運送、處理和保存

（1）標本采集后應(yīng)確認無血凝塊存在，采集后宜在1 h內(nèi)送檢，采用規(guī)定的離心速度和離心時間（室溫、1500 g、不少于15 min）分離血漿，以獲得乏血小板血漿（血小板計數(shù)＜10 ×109/L），4 h內(nèi)完成血漿標本檢測。

（2）依照 WS/T 359的要求在常溫下進行標本運送，標本應(yīng)在采集后盡快送檢（若不能及時檢測，應(yīng)在分離血漿后置于4℃冰箱4 h內(nèi)完成檢測）。冰凍血漿在-20℃條件下最多可保存2周，在-70℃條件下最多可保存6個月。

（3）若使用冷藏標本，檢測前應(yīng)將標本于室溫放置15 min～20 min使其恢復(fù)至室溫。

（4）若使用冰凍血漿標本，應(yīng)將其置于37℃水浴快速復(fù)融至少4 min～5 min，檢測前標本應(yīng)充分混勻。

3、標本拒收標準

實驗室應(yīng)制訂不合格標本的拒收標準，包括（但不限于以下內(nèi)容）：

a)申請單和試管標簽上的信息不一致、試管條碼信息錯誤、試管標簽或試管條碼脫落；

b)從標本采集到實驗室接收標本的時間不符合實驗室的規(guī)定；

c)當(dāng)標本存在凝塊、溶血、抗凝劑使用錯誤或采血量不當(dāng)（與標示量相差超過±10%）時。

4、標本誤差來源

標本誤差來源包括（但不限于以下內(nèi)容）：

a)采血量不當(dāng)（與標示量相差超過±10%）；

b)使用非規(guī)定的抗凝劑（如EDTA鹽或草酸鹽）、抗凝劑的濃度、用量不準確；

c)標本有凝塊、溶血、黃疸、脂血或混濁；

d)標本混勻不當(dāng)，混勻不充分或劇烈混勻，產(chǎn)生氣泡等；

e)采血器或貯血管不潔，或受到污染；使用非規(guī)定、不適當(dāng)?shù)臉吮静杉埽?/span>

f)血細胞比容高于或等于55%；

g)急性炎癥反應(yīng)、纖維蛋白原升高或纖維蛋白原異?？墒共捎肞T途徑測定的凝血因子活性不準確；

h)延遲檢測或使用不標準的方法處理、運送及貯存測試標本。

五、檢驗過程

1、檢測系統(tǒng)

（1）檢測方法原理

a)一期法檢測

檢測原理：基于檢測待測標本對乏因子血漿所致的凝固時間（PT 或 APTT）延長的糾正能力。將稀釋后的待測血漿與乏因子血漿混合后進行 PT 或 APTT 檢測，檢測結(jié)果與待測血漿中的凝血因子活性呈負相關(guān)。通過使用已知凝血因子活性的血漿進行系列稀釋并與乏因子血漿混合后進行PT或APTT檢測建立的定標曲線，可以得出待測血漿中相應(yīng)凝血因子的活性。一期法檢測是目前常用的凝血因子活性測定方法。

基于 PT 檢測的凝血因子：因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ

基于 APTT 檢測的凝血因子：因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ與Ⅻ

b）二期法檢測

該方法適用于因子Ⅷ/Ⅸ活性檢測，以因子Ⅷ活性檢測為例，其原理為：基于檢測因子Ⅷ作為輔因子與因子Ⅸa形成復(fù)合物活化因子Ⅹ的能力，通過檢測生成的因子Ⅹa的量可計算因子Ⅷ的活性。該實驗分為兩步進行，第一步：待測標本與含有磷脂、鈣離子、因子Ⅸa以及因子Ⅹ的試劑溶液進行孵育后生成因子Ⅹa；第二步再加入過量的凝血酶原和纖維蛋白原，檢測纖維蛋白凝塊形成的時間。測得的凝固時間可以通過查對已知凝血因子活性的定標曲線或代入回歸方程，得到凝血因子活性。

c）發(fā)色底物法檢測

該方法是二期法檢測的改進方法，在因子Ⅷ活性檢測時使用。第一步：待測標本與含有磷脂、鈣離子、因子Ⅸa以及因子Ⅹ的試劑孵育后生成因子Ⅹa；第二步加入因子Ⅹa的發(fā)色底物進行檢測，因子Ⅹa 可作用在發(fā)色底物S2765，使其釋放對硝基苯胺（paranitroaniline，pNA），后者可在405 nm波長條件下通過讀取吸光度值計算該物質(zhì)的生成量，通過計算轉(zhuǎn)換為凝血因子活性。

2、檢測系統(tǒng)選擇

（1）實驗室宜選用儀器與試劑配套的檢測系統(tǒng)。使用非配套檢測系統(tǒng)時，應(yīng)確認該系統(tǒng)是否能滿足性能驗證要求。

（2）實驗室在選擇檢測系統(tǒng)時，應(yīng)考慮的因素（但不限于以下內(nèi)容）包括：

a)臨床標本性狀：黃疸、脂濁等影響光散射強度的標本，適宜選擇物理學(xué)檢測原理的檢測系統(tǒng)（如磁珠法）進行測定；

b)標本數(shù)量與檢測速度：檢測系統(tǒng)能夠在規(guī)定時間內(nèi)完成常規(guī)標本和急診標本的測定。

2、試劑和耗材

（1）APTT 試劑

不同APTT試劑由于激活劑的不同而對凝血因子活性檢測的敏感性存在差異。檢測凝血因子缺乏時，宜選用對凝血因子缺乏有高敏感性的APTT試劑（可檢出凝血因子活性＜30%的標本，包括凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ等）。針對懷疑存在狼瘡抗凝物的標本，宜使用對磷脂不敏感的APTT試劑盒。實驗室在更換APTT試劑批號時，應(yīng)進行新舊試劑的比對：根據(jù)驗證標本的目標水平（驗證標本應(yīng)盡量覆蓋檢測項目的可報告范圍，并至少包含正常水平和異常水平）、各水平的確定臨界值、不精密度值等參數(shù)來確定所需標本數(shù)，分別采用新舊試劑進行檢測，計算偏差和平均偏差絕對值，并與拒絕限進行比較，判斷批號間驗證是否通過。

（2）PT 試劑

不同PT試劑中凝血活酶因其來源不同（可來自人、兔、牛、猴等腦或其他組織）而具有不同的敏感度。應(yīng)選擇敏感度高（ISI接近1）的凝血活酶試劑，實驗室在更換凝血活酶試劑時，應(yīng)對其ISI值進行評估。

（3）乏因子血漿

乏因子血漿應(yīng)符合以下要求：待測的目標凝血因子活性低于0.01 IU/mL（1%），其他凝血因子活性高于0.5 IU/mL（50%），纖維蛋白原含量高于1.0 g/L。實驗室應(yīng)對每個批次的乏因子血漿進行檢測，以確保所用的乏因子血漿質(zhì)量符合上述要求。乏因子血漿應(yīng)在冷藏（凍干形式）或冰凍（貯存-70℃冰箱）條件下妥善保存。

（4）定標血漿

通常使用商品化的標準血漿或校準血漿，其標示值需溯源至國際標準物質(zhì)（如世界衛(wèi)生組織發(fā)布的國際標準品）。若實驗室自行制備定標血漿，應(yīng)至少使用20例以上健康志愿者（男女各半，年齡18歲～55歲，六個月內(nèi)未服用任何藥物，女性未處于妊娠期或月經(jīng)期）的混合血漿。血漿制備時需進行兩次離心，將第一次離心獲得的乏血小板血漿的上層2/3體積轉(zhuǎn)移入加塞塑料試管進行第二次離心（室溫、1500 g、不少于15 min），注意不要使用第二次離心后的底部血漿，以確保充分去除血小板，以國際標準物質(zhì)作為溯源標準確定其凝血因子活性水平，并保證凝血因子的活性在（1±0.2）IU/mL。

（5）試劑誤差來源

試劑誤差來源包括（但不限于以下內(nèi)容）：

a)試劑已被污染；

b)配制的試劑未采用 I 級試劑級水或廠家zhi定用水、復(fù)溶時使用非規(guī)定的稀釋液、復(fù)溶時稀釋液加量不準；

c)在運輸或貯存過程中，因處置不當(dāng)(如溫度等因素)而導(dǎo)致試劑變質(zhì)；

d)所用試劑超過了有效期或復(fù)溶后的穩(wěn)定期。

3、定標曲線制作

（1）正常值定標曲線

采用全自動血液凝固分析儀進行凝血因子活性檢測時，可按照儀器生產(chǎn)廠商的要求預(yù)先設(shè)定參考血漿的稀釋比例并使用配套參考血漿制作定標曲線。參考血漿的稀釋比例應(yīng)至少包括 1/10、1/20、 1/40 和 1/80 四個水平。采用手工法或半自動血液凝固分析儀進行檢測時，需根據(jù)不同比例稀釋標本的 PT 或 APTT 檢測結(jié)果與對應(yīng)的稀釋比例在半對數(shù)或雙對數(shù)坐標紙上手工繪制定標曲線。（示例見附錄 A）

定標曲線的線性回歸方程的 r 值應(yīng)在 0.998～1.000，斜率應(yīng)在 0.9～1.1。

頻率：對于采用手工法或半自動方法進行凝血因子活性檢測時，每批次均需建立本次的定標曲線；全自動檢測方法在試劑批號更換、儀器設(shè)備調(diào)整、室內(nèi)質(zhì)控失控等情況下需重新建立定標曲線。

（2）低值定標曲線

針對低值標本（凝血因子活性水平＜5%）應(yīng)建立低值定標曲線，定標血漿可按照1/20、1/40、1/80……的比例進行稀釋，其余要求同正常定標曲線的制備。

4、性能驗證

（1）性能驗證一般要求

a）新的檢測系統(tǒng)用于臨床檢測前，依據(jù)廠家說明書的要求進行校準和性能驗證，至少應(yīng)包括批內(nèi)精密度、批間精密度、正確度和可報告范圍等。

b）驗證周期：在更換設(shè)備、組件以及試劑時需要進行性能驗證。

（2）重復(fù)性

重復(fù)性又稱批內(nèi)精密度，是以連續(xù)檢測結(jié)果的變異系數(shù)（CV）為評價指標。重復(fù)精密度的驗證方法：至少使用兩個濃度水平（包含正常和異常水平）的新鮮臨床標本或質(zhì)控物進行檢測，每個標本按常規(guī)方法重復(fù)檢測 11 次，剔除第 1 次檢測結(jié)果，計算后 10 次檢測結(jié)果的變異系數(shù)。內(nèi)源性凝血因子(APTT 途徑)和外源性凝血因子(PT途徑)的正常標本和異常標本的 CV 應(yīng)均≤10%。

（3）期間精密度

期間精密度又稱為批間精密度，以室內(nèi)質(zhì)控檢測結(jié)果的變異系數(shù)為評價指標。批間精密度的驗證方法：至少使用兩個濃度水平（包含正常和異常水平）的質(zhì)控物或臨床標本，在標本檢測當(dāng)天至少進行1次室內(nèi)質(zhì)控，剔除失控數(shù)據(jù)后按批號或按月份，計算累計在控數(shù)據(jù) 20 次結(jié)果的變異系數(shù)。內(nèi)源性凝血因子(APTT 途徑)和外源性凝血因子(PT途徑)的正常標本和異常標本的 CV 應(yīng)均≤15%。

（4）正確度

正確度以國際標準物質(zhì)或商業(yè)校準物實際檢測結(jié)果與理論值的偏倚（Bias）為評價指標。實驗室應(yīng)盡可能使用有證標準物質(zhì)（如國際標準物質(zhì)或國家標準物質(zhì)）進行正確度驗證，在無法得到上述標準物質(zhì)的情況下，可使用商業(yè)標準物質(zhì)。正確度的驗證方法：將標準物質(zhì)稀釋至預(yù)期濃度水平（如醫(yī)學(xué)決定水平）并至少重復(fù)檢測10次，計算檢測結(jié)果的均值與理論值的百分偏差，要求百分偏倚（Bias）應(yīng)≤15%。

5、檢測程序

（1） 標準操作程序的建立與實施

實驗室應(yīng)依照《醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法》、本文件和儀器試劑生產(chǎn)廠商的操作說明制定各檢測項目的標準操作程序（Standard Operation Procedure，SOP）文件，并嚴格按照 SOP 文件的要求進行操作。

（2）檢測方法的選擇

因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ的活性均可使用一期法進行檢測，因子Ⅷ/Ⅸ活性檢測還可使用二期法和發(fā)色底物法。由于方法特性的不同，由某些特定基因突變位點導(dǎo)致的血友病 A 患者其因子Ⅷ：C一期法檢測結(jié)果與臨床出血表現(xiàn)不相符，可采用二期法和發(fā)色底物法進行測定。

（3）待測血漿標本的稀釋要求

應(yīng)根據(jù)檢測的凝血因子制定相應(yīng)的血漿稀釋倍數(shù)，目的是為了得到一個具有可接受斜率的曲線。因子Ⅷ和Ⅸ活性檢測血漿標本至少應(yīng)進行 2 個稀釋度的檢測，有條件的實驗室可進行 3 個稀釋度的檢測，對于低值標本可降低稀釋倍數(shù)。

（4）檢測系統(tǒng)誤差的來源

檢測系統(tǒng)誤差來源包括（但不限于以下內(nèi)容）：

a)定標時錯誤輸入?yún)⒖佳獫{數(shù)值；

b)使用曲線的平臺區(qū)解釋結(jié)果；

c)不正確的孵育或活化時間；

d)儀器操作方法不正確；

e)儀器故障:如光源不穩(wěn)定、溫度波動、試劑濺出、試劑加入不準(量少)及電子干擾等；

f)稀釋不正確；

g)冰凍血漿在-70℃條件下貯存超過 6 個月或者不適當(dāng)?shù)馁A存環(huán)境；

h)乏因子基質(zhì)血漿含有＞0.01 IU/mL(1%)的凝血活性，或含有凝血因子抑制物，或一個/多個凝血因子活性＜50%。

6、室內(nèi)質(zhì)量控制

（1）質(zhì)控血漿的選擇：實驗室可使用商業(yè)質(zhì)控血漿或自制質(zhì)控血漿（冰凍血漿）進行室內(nèi)質(zhì)量控制，質(zhì)控血漿應(yīng)至少具有 2 個濃度水平（包含正常水平和異常水平），使用自制質(zhì)控血漿時應(yīng)與商業(yè)質(zhì)控血漿進行同步檢測以評價其適用性。實驗室應(yīng)根據(jù)實際工作需要確定質(zhì)控血漿的數(shù)量，避免質(zhì)控血漿批號更換過于頻繁。

（2）頻率：實驗室應(yīng)根據(jù)檢測標本量或檢測批次確定室內(nèi)質(zhì)控的頻率，并保證每次開機檢測標本前至少進行一次正常水平和異常水平的室內(nèi)質(zhì)控；使用新開瓶/新復(fù)溶試劑進行標本檢測前，宜首先進行質(zhì)控品檢測。

（3）質(zhì)控均值和允許范圍的確定：每個批號質(zhì)控血漿在使用前，應(yīng)由實驗室通過檢測確定均值和允許范圍，質(zhì)控品制造商規(guī)定的“標準值"和“允許范圍"只能作為參考。具體方法為：將質(zhì)控血漿至少檢測 10 d，每天至少檢測 2 次，剔除超出 3SD 外數(shù)據(jù)，輸入 20 次結(jié)果完成初始化，以 20 次數(shù)據(jù)形成的均值作為當(dāng)月質(zhì)控圖的中心線。SD、CV 在月末完成數(shù)據(jù)錄入并確認后生成標值自動傳遞給下一月進行積累，這樣每個月進行標值累積，直至累積達到zhi定月數(shù)（3～5個月），計算累積均值和累積標準差，以此作為室內(nèi)質(zhì)控均值和標準差；室內(nèi)質(zhì)控建議選用 Westergard 質(zhì)控規(guī)則，至少包括 13s 和 22s 規(guī) 則，其余可根據(jù)實驗室實際情況酌情選用。

（4）實驗室應(yīng)記錄結(jié)果并統(tǒng)計均值與標準差，繪制質(zhì)控圖。若發(fā)現(xiàn)結(jié)果失控應(yīng)按步驟分析查找原因（檢查試劑、質(zhì)控血漿及儀器等），待各因素排查后再進行質(zhì)控血漿的檢測，質(zhì)控結(jié)果在控后方可進行待測標本的檢測。做好失控原因分析和采取的糾正措施記錄。

（5）實驗室應(yīng)定期（每月）統(tǒng)計室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果，結(jié)果應(yīng)符合 （上述“3"質(zhì)控均值和允許范圍的確定）的要求。

7、室間質(zhì)量評價

（1）實驗室應(yīng)參加室間質(zhì)量評價機構(gòu)組織開展的室間質(zhì)量評價活動，以保證采用相同實驗室檢測系統(tǒng)之間結(jié)果的可比性。

（2）對于沒有開展室間質(zhì)評的項目應(yīng)進行實驗室間結(jié)果比對，以保證不同實驗室之間結(jié)果的可比性。

8、檢驗結(jié)果的比對

若實驗室內(nèi)使用多個檢測系統(tǒng)測定同一種分析物時，應(yīng)定期進行結(jié)果比對（宜半年一次），至少使用20份臨床標本（覆蓋正常和低值標本）按照常規(guī)操作流程進行檢測，正常濃度標本的比對偏倚應(yīng)≤15%，低值濃度標本的比對偏倚應(yīng)≤30%（或按照生產(chǎn)廠家和試劑說明書要求）。

六、檢驗后過程

1、參考區(qū)間

對于每個凝血因子，實驗室可參照文獻報道的參考區(qū)間進行驗證后使用。若不適用，應(yīng)根據(jù)所用儀器、試劑、采血方法、主要就醫(yī)人群（成人或兒童）及所用抗凝劑建立適用于本室的參考區(qū)間。參考區(qū)間以相同的單位顯示在每一份報告單上。

2、報告結(jié)果

報告前，應(yīng)確定待測標本檢測結(jié)果已乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)，采用不同稀釋比例測定值的平均值作為報告結(jié)果。報告單位為活性%或 IU/mL 均可，但需在檢驗報告中統(tǒng)一規(guī)范凝血因子活性報告單位及格式。超出定標曲線值以外的結(jié)果亦可報告以大于或小于相應(yīng)的可讀值報告，但應(yīng)與臨床聯(lián)系，共同確定其原因。舉例說明請見附錄 B。

當(dāng)懷疑凝血因子存在結(jié)構(gòu)異常時，可考慮檢測抗原，但抗原檢測不是常規(guī)檢測項目，多用于科研。

3、結(jié)果判讀誤差的來源

可能的結(jié)果判讀誤差來源包括（但不限于以下內(nèi)容）：

a)未辨認出兩條曲線缺乏平行；

b)未辨認出兩條曲線缺乏線性；

c)采用推斷的方法得到定標曲線范圍之外的數(shù)據(jù)。

附 錄 A

（資料性）

定標曲線手工繪制

采用手工法或部分半自動血液凝固分析儀進行檢測時，需根據(jù)不同比例稀釋標本的PT或APTT檢測與 對應(yīng)的稀釋比例在半對數(shù)或雙對數(shù)坐標紙上手工繪制定標曲線，圖應(yīng)形成“S"型曲線，兩端扁平，中 間呈線性(圖A.1，圖A.2)。線性區(qū)計算所得r值應(yīng)在 0.998～1.000、斜率應(yīng)在 0.9～1.1 范圍內(nèi)。

附 錄 B

（資料性）

結(jié)果解讀

待測血漿標本經(jīng)三點稀釋后形成的標本結(jié)果曲線應(yīng)形成一條與工作定標曲線平行的直線。若以上的情況不存在，應(yīng)該考慮以下可能性：

a)若兩個或更多鄰近點形成一條平行于定標曲線的直線，但沒有實驗結(jié)果落在可讀范圍之內(nèi)，進一 步稀釋參考血漿或受檢血漿則可能產(chǎn)生可讀結(jié)果(見圖B.1)；

b) 若僅一個試驗結(jié)果落在可讀范圍，同時與鄰近點形成的直線不平行于定標曲線，則應(yīng)稀釋受檢 血漿，以便獲得可讀結(jié)果；

c) 若受檢血漿與參考血漿曲線不呈平行，而一個以上的結(jié)果落在已知的線性范圍內(nèi)，則應(yīng)當(dāng)懷疑 標本中有抑制物存在(見圖B.2)。在報告結(jié)果時，以最高稀釋度報告，同時應(yīng)說明標本中可能有抑制物， 應(yīng)做有關(guān)檢查確定；

d) 若所有的實驗結(jié)果均落在線性范圍之外，同時出現(xiàn)類似的試驗結(jié)果(不考慮稀釋所造成影響)， 這個現(xiàn)象提示所有的試驗結(jié)果均位于“S"曲線的平臺區(qū)。這是典型的嚴重凝血因子缺乏狀態(tài)(見圖B.2)。

這種情況，應(yīng)采用低值定標曲線進行測定，并且要求對標本進行兩次測定。若患者血漿的凝固時間 更延長，則患者結(jié)果可以低于該凝血因子檢測低限。

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